一、细胞特性

1. 细胞名称：NFS-60细胞
2. 形态：淋巴母细胞样，悬浮生长
3. 含量：>1x10⁶ 个/瓶
4. 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5. 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

二、细胞接收后的处理：
1、贴壁细胞

1. 收到T25方瓶细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们（冻存管细胞收到后直接37℃水浴复苏或直接放置于液氮中长期储存）。
2. 请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3. 弃去T25瓶中的培养基，换用新鲜的*培养基。
4. 如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代。
5. 接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。

2、悬浮细胞

1. 收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2. 请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将15ml离心管置于37℃培养约2-3h。
3. 1200rpm离心5min，弃去15ml离心管中的培养基，细胞沉淀用新鲜的*培养基重悬并培养。
4. 如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代。
5. 接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。

                      
本公司的细胞培养操作规程，供参考
一、NFS-60细胞培养基及培养冻存条件准备：

1. 准备RPMI-1640培养基，90%；优质胎牛血清，10%；15ng/mL G-CSF；1% P/S。
2. 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3. 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。

二、细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

   对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化2-3分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。
3. 轻轻吹打后吸出，移入15ml离心管中，在1200RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加入1mL培养液后吹匀。
4. 移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，先要消化处理并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的1-3步骤进行，后的重悬液使用血清。悬浮细胞直接计数后离心，用血清重悬浮，加DMSO至终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X10⁶个细胞冻存。

注意事项：
1. 收到冻存管细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
3. 细胞用途：仅供科研使用。

发货方式：
复苏后发货：我们复苏细胞后发货，货期一周左右，免运费。（气温较好建议复苏后发货）
冻存发货(干冰运输）：需额外增加干冰运费，选择干冰运输的我们发两管细胞，为了保证客户接种可靠性多发一管。（气温低于0℃须冻存发货）
细胞发货采取专业的运输包装，并选择快捷的运输方式（顺丰速运或其他空运快递）
本公司细胞引种来源：ATCC、DSMZ、ECACC、武大细胞库、上海生化细胞所、中国科学院典型培养物保藏委员会等。

公司简介：
    无锡欣润生物科技有限公司是一家致力于为药物公司、卫生防疫机构和科研院所提供符合GLP标准规范的细胞系、原代细胞及体外药物代谢和药物间相互作用评价的产品公司，并提供以原代细胞为中心的体外药物筛选相关技术服务的生物高科技企业。
    公司拥有多项*成熟的原代细胞分离培养技术，其中肝脏类细胞、成年鼠心肌细胞、血管内皮细胞、神经细胞、胰岛细胞、小鼠骨髓间充质干细胞、肝S9和肝微粒体等特色产品及相关服务获得众多合作伙伴的*。
    公司始终以“专注产品，用心服务”为核心价值，致力于打造原代细胞分离培养品牌，为各类药物研发机构提供细胞生物学方面的高质量产品和优质服务。